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  • 第1题:

    在实时荧光定量PCR中,参比荧光染料常用于报告基团染料荧光信号的标准化,以及非PCR相关的荧光波动的校正。()


    正确答案:正确

  • 第2题:

    用8连管进行荧光定量PCR操作时,不能在管盖上进行标记以免影响检测,但可以在旁边或侧面做标记。()


    正确答案:错误

  • 第3题:

    实时荧光定量PCR


    正确答案:是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

  • 第4题:

    实时荧光定量PCR仪有哪些种类?各有什么特点?


    正确答案: (1)金属板式实时定量PCR仪可容纳的样本量大,无需特殊耗材,但温度均一性欠佳,有边缘效应,标准曲线的反应条件难以做到与样品完全一致。
    (2)离心式实时定量PCR仪能保障标准曲线和样品之间反应条件的一致性。但可容纳样品量少,有的需用特殊毛细管作样品管,增加了使用成本。
    (3)各孔独立控温的定量PCR仪各孔独立控温,适合多指标快速检测。但是上样不如传统办法方便,而且需要独特的扁平反应管,使用成本较高。

  • 第5题:

    荧光实时定量PCR技术


    正确答案: 在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,通过检测荧光信号,实时监测整个PCR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。

  • 第6题:

    分子荧光定量分析有哪些方法?荧光分析应注意哪些事项?


    正确答案: 分子荧光定量分析有工作曲线法、比较法和灭光猝灭法等。
    荧光分析应注意:
    (1)防止荧光污染荧光污染通常是指所用器皿、溶剂混有非待测荧光体,或荧光溶液制备、保存不当而引起的荧光干扰现象。肥皂粉、洗衣粉、去污粉和常用洗液都能产生荧光,手上的油脂也会污染所用器皿。滤纸是芳环类化合物的残渣,常有荧光。涂旋塞用的润滑油类有很强的荧光,橡皮塞、软木塞和去离子水也可造成荧光污染,均应避免使用。
    溶液长期放置,因细茵滋生会产生荧光污染和光散射;对极稀的溶液会因被器壁吸附或被溶液中的氧氧化而造成损失。因此,所用溶液要采取保护措施,最好新鲜配制并设法除去溶解氧的干扰。
    (2)防止散射光的干扰包括溶液中可能存在的丁铎尔散射光、瑞利散射光和拉曼散射光的干扰。

  • 第7题:

    实时荧光定量RT-PCR是()。

    • A、可以实现初始模板拷贝数的定量
    • B、SYBR GreenⅠ特异性强
    • C、原理利用了临界点循环
    • D、利用PCR最终产物量高低进行定量
    • E、特异的分子信标探针可以提高定量的准确性

    正确答案:A,C,E

  • 第8题:

    实时荧光定量PCR扩增仪的荧光检测系统主要由哪两个部分组成?


    正确答案: 实时荧光定量PCR扩增仪的荧光检测系统主要包括激发光源和检测器。
    (1)激发光源一般为卤钨灯光源或发光二极管光源。
    (2)检测器常用的是超低温CCD成像系统和光电倍增管(PMT)。

  • 第9题:

    问答题
    概述荧光定量PCR技术的原理。

    正确答案: 又称实时PCR技术。该技术在常规PCR基础上,添加了一条标有两个荧光基团的荧光双标记探针,一个标记在探针的5′端称为报告基团(Reporter,R);另一个标记在探针的3′端称为荧光抑制基团或称淬灭基团(Quencher,Q)。两者可构成能量传递结构,即5′端R发出的荧光信号可被3′端R基团抑制。3′端的-OH已被封闭,不具有延伸的能力。探针引物在无特异性PCR扩增时,荧光信号不改变。在PCR反应开始后,随着链的延长,荧光定量PCR的Taq酶沿着DNA模板移动到荧光标记探针的结合部位,发挥它的5′-3′外切酶活性,将荧光探针切断。一但切断,Q基团的抑制作用消失,从而引起R基团的荧光信号增长,被释放的游离R基团的数目和PCR产物的数量是一对一的关系,因此R基团的荧光信号的强弱就与PCR产物的数量成正比关系。测定出前者就可以推算出后者。这就是荧光定量PCR的原理。在PCR的过程中,连续不断地检测反应体系中的荧光信号的变化,当信号增强到某一阈值时(根据荧光信号基线的平均值和标准差,计算出99.7%的置信度大于平均值的荧光值,即阈值),此时循环次数(ct)就被记录下来,该循环参数和PCR体系中起始DNA量的对数值之间有严格的线性关系,利用阳性梯度标准品的ct值,制成标准曲线,再根据样品的ct值就可以准确定出起始DNA的拷贝数。
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    何谓荧光实时定量PCR(RQ-PCR)技术?

    正确答案: 荧光实时定量PCR(real-timequantitativePCR,RQ-PCR)技术即在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,荧光信号的变化真实的反映了体系中模板的增加,通过检测荧光信号,从而实时监测整个PCR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    名词解释题
    荧光定量PCR

    正确答案: 是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    名词解释题
    荧光实时定量PCR技术

    正确答案: 在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,通过检测荧光信号,实时监测整个PCR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    大多数实时荧光定量PCR仪采用____染料作为参比荧光染料,因为它不会对实时荧光定量PCR反应产生影响,且可将其荧光信号与其它报告基团或淬灭染料区分开来。()

    • A、GFP
    • B、ROX
    • C、DEPC
    • D、DAPI

    正确答案:B

  • 第14题:

    荧光定量PCR


    正确答案:荧光定量PCR:荧光定量PCR亦称实时荧光PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号检测整个PCR过程,获得在线描述PCR过程的动力学曲线,最后通过标准曲线对未知模板核酸进行定量分析的方法。

  • 第15题:

    RT-PCR是()。

    • A、包括反转录反应
    • B、PCR的模板是mRNA
    • C、可以进行基因表达定量分析
    • D、PCR的模板是cDNA
    • E、不需要DNA聚合酶

    正确答案:A,C,D

  • 第16题:

    何谓荧光实时定量PCR(RQ-PCR)技术?


    正确答案: 荧光实时定量PCR(real-timequantitativePCR,RQ-PCR)技术即在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,荧光信号的变化真实的反映了体系中模板的增加,通过检测荧光信号,从而实时监测整个PCR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。

  • 第17题:

    简述制定X荧光定量分析方法的基本步骤。


    正确答案: (1)根据样品、标样及分析精度和准确度的要求,选择制样方法;
    (2)用标准样品选择最佳分析条件;
    (3)制定工作曲线;
    (4)用标准样品验证分析方法的可靠性及其分析数据的不确定度。

  • 第18题:

    荧光定量FQ-PCR主要应用于哪些方面?


    正确答案: FQ-PCR是一种核酸定量分析技术,该技术在PCR反应系统中引入荧光标记探针,具有高灵敏性,高特异性和高精确性的特点。目前被用于病原体检测、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变和多肽性研究等多个领域。

  • 第19题:

    目前市场上实时荧光定量PCR仪一般有哪些类别()。

    • A、金属板式实时定量PCR仪
    • B、梯度定量PCR仪
    • C、原位定量PCR仪
    • D、离心式实时定量PCR仪
    • E、各孔独立控温的定量PCR仪

    正确答案:A,D,E

  • 第20题:

    多选题
    实时荧光定量RT-PCR是()。
    A

    可以实现初始模板拷贝数的定量

    B

    SYBR GreenⅠ特异性强

    C

    原理利用了临界点循环

    D

    利用PCR最终产物量高低进行定量

    E

    特异的分子信标探针可以提高定量的准确性


    正确答案: D,A
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    多选题
    目前市场上实时荧光定量PCR仪一般有哪些类别()。
    A

    金属板式实时定量PCR仪

    B

    梯度定量PCR仪

    C

    原位定量PCR仪

    D

    离心式实时定量PCR仪

    E

    各孔独立控温的定量PCR仪


    正确答案: C,D
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    单选题
    以空气为加热介质的PCR仪是()
    A

    金属板式实时定量PCR仪

    B

    96孔板式实时定量PCR仪

    C

    离心式实时定量PCR仪

    D

    各孔独立控温的定量PCR仪

    E

    荧光实时定量PCR仪


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    名词解释题
    实时荧光定量PCR

    正确答案: 是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
    解析: 暂无解析