基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？
题目
基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？
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第1题：
链霉菌基因克隆的基本步骤有哪些？
正确答案: 链霉菌基因克隆的基本步骤：
（1）制备供体DNA片段；
（2）制备载体DNA；
（3）连接载体和供体DNA片段；
（4）将受体菌制成原生质体；
（5）将连接了供体DNA片段的载体对受体菌的原生质体进行转化；
（6）让原生质体再生细胞壁，随后对转化的细胞进行选择。 -
第2题：
获得目的基因的手段有哪些？并简述其工作原理.
正确答案: 目的基因的获取方法有：从基因文库中提取目的基因，使用PCR扩增技术获得目的基因，人工合成。
①从基因文库中获取：用限制性内切酶直接获取
②鸟枪法：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制（在遗传学中叫做扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。
③mRNA逆转录成DNA，“RT-PCR法”
真核生物的基因含有不表达的内含子，而有时内含子序列很长，因此这种基因难以和载体DNA结合。这种方法是将含有目的基因的mRNA提取出来，然后以mRNA为模板用，用逆转录酶合成cDNA，利用特异性引物PCR钓取目的基因，最后测序验证。
④人工合成：根据已知氨基酸序列合成DNA
根据基因表达产物的氨基酸顺序，搞清楚基因的核苷酸序列，然后先合成一个个含少量核苷酸的DNA片段，再利用碱基对互补关系使它们形成双链DNA片段，再用连接酶把小的双链DNA片段逐个按顺序连接起来，使双链逐渐加长，最后得到一个完整基因。 -
第3题：
目的基因克隆的基本方法有哪些？
正确答案: （1）直接从染色体DNA中分离：
仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离，较少采用。
（2）人工合成：
根据已知多肽链的氨基酸顺序，利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。适应于编码小分子多肽的基因。
（3）从mRNA合成cDNA：
采用一定的方法钓取特定基因的mRNA，再通过逆转录酶催化合成其互补DNA（cDNA），除去RNA链后，再用DNA聚合酶合成其互补DNA链，从而得到双链DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。
（4）利用PCR合成：
如已知目的基因两端的序列，则可采用聚合酶链反应（polymerase chainreaction，PCR）技术，在体外合成目的基因。
（5）从基因文库中筛选：
首先建立基因组或cDNA文库，利用探针从文库中筛选目的克隆。 -
第4题：
基因克隆中目的基因的来源可以是（）。
- A、从基因组文库中获得
- B、从cDNA文库中获得
- C、PCR扩增
- D、人工合成
- E、细胞DNA
正确答案:A,B,C,D,E -
第5题：
获得目的基因的方法有哪些？
正确答案:获得目的基因的方法有：鸟枪法（shotgun）；物理化学法（密度梯度离心法、单链酶法、分子杂交法）；化学合成法；酶促逆转录合成法；PCR扩增法。 -
第6题：
何谓目的基因？获得目的基因有何种方法？
正确答案: 目的基因：在基因工程设计和操作中，被用于基因重组、改变受体细胞性状和获得预期表达产物的基因。
获取方法：①利用限制性内切核酶酶切法直接分离目的基因；②利用PCR直接扩增目的基因；③化学合成；④通过构建基因组文库或cDNA文库分离目的基因 -
第7题：
问答题在基因工程中可通过哪3种途径获得目的基因的DNA片段？正确答案： 从供体细胞（主要是原核微生物）提取染色体DNA构建基因库，再筛选出基因克隆，或通过PCR扩增出目的基因的DNA片断。从供体细胞（主要是真核生物）提取总RNA（或总mRNA.然后逆转录为cDNA，构建cDNA库，筛选出cDNA克隆或通过RT-PCR扩增出目的基因的cDNA。用化学合成法合成目的基因。解析： 暂无解析 -
第8题：
单选题根据大量EST具有相互重叠的性质，通过计算机算法获得cDNA全长序列，这种克隆基因的方法是（）。A重叠克隆
B电子克隆
C基因步移
D基因重组
正确答案： A解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？正确答案： （1）从基因组文库（genomic library）中获得；
（2）从cDNA文库中获得；
（3）PCR扩增特定基因；
（4）人工合成。解析： 暂无解析 -
第10题：
判断题一旦有了一套已知顺序的基因组克隆，通过从文库中获得覆盖目的突变基因所在基因组区的所有克隆，就可以进行染色体步移。A对
B错
正确答案： 对解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题什么是目的基因？获得目的基因的途径有哪些?正确答案： 目的基因（objectgenE.，靶基因（targetgenE.根据基因工程的目的和设计所需要的某些DNA分子片段。直接分离法、PCR扩增、构建基因组文库法、构建cDNA文库法、化学合成法。解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源？正确答案： （1）从染色体DNA中直接分离：主要针对原核生物。
（2）化学合成法：由已知多肽的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，利用DNA合成仪人工合成其基因。
（3）从基因组DNA文库中筛选分离组织/细胞染色体DNA：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成片段，与适当的克隆载体连接后转入受体菌扩增，即获得基因组DNA文库，用核酸探针将所需目的基因从基因文库中“钓”取出来。
（4）从文库中筛选cDNA：提取mRNA，利用反转录酶合成与其互补的DNA（cDNA）分子，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌，即获得cDNA文库，然后采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。
（5）用PCR从基因组DNA或cDNA中扩增目的基因。解析： 暂无解析 -
第13题：
在基因工程中可通过哪3种途径获得目的基因的DNA片段？
正确答案: 从供体细胞（主要是原核微生物）提取染色体DNA构建基因库，再筛选出基因克隆，或通过PCR扩增出目的基因的DNA片断。从供体细胞（主要是真核生物）提取总RNA（或总mRNA.然后逆转录为cDNA，构建cDNA库，筛选出cDNA克隆或通过RT-PCR扩增出目的基因的cDNA。用化学合成法合成目的基因。 -
第14题：
分离目的基因的途径有哪些？
正确答案:（1）酶切法
（2）PCR法
（3）化学合成法
（4）基因组或cDNA文库法 -
第15题：
克隆基因目的蛋白的表达的形式主要有哪些类型？
正确答案: 表达蛋白按溶解特性通常包括：不溶性蛋白和可溶性蛋白两类，具体包括如下几种结构形态：包涵体型蛋白、融合型蛋白、分泌型蛋白 -
第16题：
在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源？
正确答案:（1）从染色体DNA中直接分离：主要针对原核生物。
（2）化学合成法：由已知多肽的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，利用DNA合成仪人工合成其基因。
（3）从基因组DNA文库中筛选分离组织/细胞染色体DNA：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成片段，与适当的克隆载体连接后转入受体菌扩增，即获得基因组DNA文库，用核酸探针将所需目的基因从基因文库中“钓”取出来。
（4）从文库中筛选cDNA：提取mRNA，利用反转录酶合成与其互补的DNA（cDNA）分子，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌，即获得cDNA文库，然后采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。
（5）用PCR从基因组DNA或cDNA中扩增目的基因。 -
第17题：
基因工程中取得目的基因的途径有（）条。
正确答案:3 -
第18题：
酶基因克隆有哪些常用的方法？
正确答案:（1）根据已知序列来扩增目的基因
（2）根据已知探针从基因文库中钓取目的基因
（3）未知序列基因的打靶 -
第19题：
多选题基因克隆中目的基因的来源可以是（）。A从基因组文库中获得
B从cDNA文库中获得
CPCR扩增
D人工合成
E细胞DNA
正确答案： B,E解析： 暂无解析 -
第20题：
单选题下列哪项不是分子克隆的主要步骤（）A目的基因的表达
B基因文库的建立
C目的基因的筛选
D目的基因的分析
正确答案： B解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题获得目的基因的方法有哪些？正确答案： 获得目的基因的方法有：鸟枪法（shotgun）；物理化学法（密度梯度离心法、单链酶法、分子杂交法）；化学合成法；酶促逆转录合成法；PCR扩增法。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题从基因组DNA或mRNA序列克隆基因的方法有哪些？正确答案： （1）同源序列法
（2）表达序列标签法
（3）连锁图谱法
（4）转座子标签法
（5）差异显示法解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题获得动物目的基因的方法有哪些？正确答案： ①cDNA方法；
②DNA的化学合成；
③利用PCR法获得基因，除了用到普通PCR法外，还要用到逆转录PCR、锚定PCR和反向PCR。解析： 暂无解析