问答题试述改良J-G法测定血清胆红素的基本原理。

第1题：

第2题：

试述改良J-G法测定血清总胆红素的原理。测定时需加入“加速剂”其成分是什么？有何作用？
血清结合胆红素与重氮盐反应生成偶氮胆红素，同样条件下，游离胆红素需要在加速剂作用下才可以发生反应，反应完成后加入终止试剂，继而加入酒石酸钾钠使紫色变为蓝色，600nm比色分析。
加速剂为咖啡因。作用破坏游离胆红素分子内氢键，使其极性增加并与重氮试剂反应。
略

第3题：

J－G法测定胆红素有哪些优点？举3－5例。

正确答案: J.G法具有以下优点：
①方法简便；
②敏感度高；
③准确度和精密度好；
④直接反应和间接反应能同时进行测定；
⑤误差因素小；
⑥溶血影响小；
⑦有自动化条件；
⑧呈色后色泽稳定。

第4题：

J-G法测定胆红素的优点有（）

• A、方法简便时间短
• B、准确精密
• C、溶血影响小
• D、呈色后色泽稳定
• E、直接和间接反应能同时检测

正确答案:B,C,D,E

第5题：

改良J-G法测定血清胆红素，加入叠氮钠终止反应后在600nm波长比色测定。

正确答案:错误

第6题：

试述血清淀粉酶碘-淀粉比色法测定原理及注意事项。

正确答案: 血清（或血浆）中α-淀粉酶催化淀粉分子中α-1，4葡萄糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1，6糖苷键支链的糊精。在有足够量基质的条件下，反应后加入的碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其蓝色的深浅与未经酶促反应的空白管比较其吸光度，从而推算出淀粉酶的活力单位。注意事项：
①草酸盐、枸橼酸盐、EDTA-Na₂及氟化钠对淀粉酶活性有抑制，肝素无抑制作用。
②酶活性在400U以下时与底物的水解量成线性，如测定管吸光度小于空白管吸光度一半时，应将血清量加大稀释倍数或减少血清加入量，测定结果乘稀释倍数。
③本法亦适用于其他体液淀粉酶的测定。
④唾液含高浓度淀粉酶，须防止混入。
⑤淀粉溶液若出现混浊或絮状物，不能再使用。

第7题：

试述用凯氏定氮法测定饲料中粗蛋白含量的基本原理。

正确答案:实验原理：饲料中含氮物质包括纯蛋白质和氨化物（氨化物有氨基酸、酰胺、硝酸盐及铵盐等），两者总称为粗蛋白质。凯氏定氮法的基本原理是用硫酸分试样中蛋白质与氨化物，使它们含氮物都转变成氨气，氨气被浓硫酸吸收变为硫酸铵。硫酸铵在浓碱的作用下放出氨气。通过蒸馏，氨气随汽水顺着冷凝流入硼酸溶液，与之结合成为四硼酸铵，后者用盐酸标准液滴定，即可测定放出的氨氮量。根据氮量，乘以特定系数，一般为6.25，即可得出样本中粗蛋白质含量。
上述过程中的化学反应如下：
2CH₃CHNH₂COOH+13H₂SO₄→（NH₄）2SO₄+6CO₂↑+12SO₂↑+16H₂O
（NH₄）2SO₄+2NaOH→2NH₃↑+2H₂O+Na₂SO₄
4H₃BO₃+NH₃→NH₄HB₄O₇+5H₂O
NH₄HB₄O₇+HCl+5H₂O→NH₄Cl+4H₃BO₃
实验步骤：分为消化、蒸馏、滴定三个方面，写出测定步骤。

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

卫生部临检中心推荐的胆红素常规测定方法是（）。

• A、J-G法
• B、胆红素氧化酶法
• C、钒酸氧化法
• D、甲醇水法
• E、DPC法

正确答案:A

第15题：

试述改良J-G法测定血清胆红素的基本原理。

正确答案: 血清与醋酸钠-咖啡因-苯甲酸钠试剂混合后，加入偶氮苯磺酸，生成紫色的偶氮胆红素。醋酸钠缓冲液保持偶氮反应的pH，咖啡因苯甲酸钠加速胆红素与偶氮苯磺酸的耦联反应。维生素C（或叠氮钠）破坏剩余偶氮试剂终止偶氮反应。最后加入强碱性酒石酸溶液使紫色偶氮胆红素转变成蓝色偶氮胆红素。在600nm波长，比色测定蓝色偶氮胆红素的生成量

第16题：

J-G法测定胆红素有哪些优点？

正确答案: 全国医学检验学会推荐的J-G法具有以下优点：
①方法简便。
②敏感度高。
③准确度和精密度好。
④直接反应和间接反应能同时进行测定。
⑤误差因素小。
⑥溶血影响小。
⑦有自动化条件。
⑧呈色后色泽稳定。

第17题：

用改良J-G法测定胆红素，如样品溶血，可使胆红素测定值偏低。

正确答案:正确

第18题：

试述染料结合法测定血清清蛋白的原理。

正确答案: 染料结合技术已广泛用于血清清蛋白测定，它是根据清蛋白通过离子键或疏水键具有结合低分子物质，包括生理代谢物和外源性染料的能力，而球蛋白很少结合外源性染料，故可在不分离清蛋白、球蛋白的条件下用某些具有指示剂作用的染料，如溴甲酚紫或溴甲酚绿等直接测定清蛋白。曾有人用过甲基橙，因其特异性不高，已被淘汰。

第19题：

改良J-G法测定血清中总胆红素的检测波长是（）

• A、480nm
• B、505nm
• C、546nm
• D、600nm
• E、630nm

正确答案:D

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：