单选题半固体穿刺保存法应加入的液体石蜡高度约（）A 0.5cmB 1.5cmC 1cmD 2cmE 2.5cm

在半固体穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱其代谢作用，通常该保存法应加入的液体石蜡高度约1cm。若不够此高度，则常会引起斜面抽干现象。

半固体培养基保存菌液时往往在表面加入一层灭菌的液体石蜡，用以隔绝空气。

考点：保存菌种的方法。[解析]冷冻真空干燥法的基本原理是在高真空状态下，利用升华原理，使预先冻结的物料中的水分，不经过冰的融化，直接以冰态升华为水蒸气被除去，从而使物料干燥，真空冷冻干燥产品可确保蛋白质、维生素等各种成分，特别是那些易挥发的热敏性成分不损失。因而能最大限度地保存细菌。

在半固体穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱其代谢作用，通常该保存法应加入的液体石蜡高度约1cm。若不够此高度，则常会引起斜面抽干现象。

培养基保存法：利用各种斜面和半固体培养基，加上石蜡油保存菌种，是一种最常用而又简易的保存方法。分类：1.普通琼脂斜面保存法：肠道杆菌、葡萄球菌等一般细菌可接种于不含糖的普通琼脂斜面上，斜面底部应加少许无糖肉膏汤，以防干涸。经35℃培养18～24h后，移种于4℃冰箱中，一般可保存一个月，每月传代一次。2.血液琼脂斜面保存法：链球菌、肺炎链球菌应接种于血液琼脂斜面上，35℃培养生长后，置4℃冰箱中保存，链球菌须半个月至1个月移种一次，肺炎链球菌的新分离菌株须2～4天移种一次，以后逐渐延长移种时间，在适应后可延至半个月移种一次。3.巧克力色斜面保存法：宜保存脑膜炎奈瑟菌，并在35℃孵箱中保存，一般每2天移种一次。4.鸡蛋斜面保存法：适于保存含有Vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的细菌，一般可保存一个月。5.半固体穿刺保存法：将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内，经35℃培养18～24h，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡，高度约lcm，置4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月。故干燥保存法不属于。正确答案为D。

冷冻真空干燥法的基本原理是在高真空状态下，利用升华原理，使预先冻结的物料中的水分，不经过冰的融化，直接以冰态升华为水蒸气被除去，从而使物料干燥，真空冷冻干燥产品可确保蛋白质、维生素等各种成分，特别是那些易挥发的热敏性成分不损失。因而能最大限度地保存细菌。