连接外源DNA与载体DNA的化学键是（）A、肽键B、氢键C、疏水键D、共价键E、盐键

第1题：

第2题：

第3题：

第4题：

第5题：

实验室内常用的连接外源性DNA与载体DNA的酶是（）

• A、Taq酶
• B、T4DNA连接酶
• C、DNA聚合酶Ⅰ
• D、DNA聚合酶Ⅱ
• E、DNA聚合酶Ⅲ

正确答案:B

第6题：

有哪些方法可以使外源DNA与载体DNA相连接，比较它们的优点。

正确答案:外源DNA片段与载体DNA分子的连接，即DNA分子的体外重组，主要依赖于限制性内切核酸酶及DNA连接酶的作用。 外源DNA片段与载体DNA分子的连接有多种。一种是用用两种不同的限制酶同时酶解一种特定的DNA分子，产生具有两种不同末端（粘性末端与另种粘性末端、粘性末端与平齐末端）的DNA片段，那么可实现外源DNA片段定向插入载体分子。另一种是非互补粘性末端DNA分子的连接，即在一定的反应条件下，可用T4 DNA连接酶将平齐末端的DNA片段有效地连接起来；对于非互补粘性末端DNA分子，在用特异作用干单链DNA的S1核酸酶处理，使其变成平齐末端后，也可用 T4 DNA连接酶进行有效的连接。其三，可采用附加衔接物（linker，是一种人工合成的双链DNA短片段，其上具有一个或数个在将与其连接的载体DNA上不存在的限制酶识别位点，可按平齐末端连接法给平齐末端片段加上相同识别位点的衔接物，再用在衔接物中具有识别位点的合适限制酶切割，用常规方法连接）的方法，提高平齐末端间的连接作用效率。其四，可利用接头进行DNA平齐末端门的连接。接头（adaptor）是一种具有粘性末端的短核昔酸双链，它与平齐末端连接后，不用经过切割即可与载体相连。这些方法是在不同的情况下发挥作用的，谈其所谓的“优点”有些牵强。应根据具体研究对象的特点和研究目的，灵活选用。

第7题：

用免疫化学法筛选重组体的原理是（）

• A、根据外源基因的表达
• B、根据载体基因的表达
• C、根据mRNA同DNA的杂交
• D、根据DNA同DNA的杂交

正确答案:A

第8题：

基因克隆中能将目的DNA与载体连接的酶是（）。

• A、限制性核酸内切酶
• B、DNA聚合酶Ⅰ
• C、DNA聚合酶Ⅰ大片段
• D、DNA连接酶
• E、碱性磷酸酶

正确答案:D

第9题：

外源基因与载体构成的重组DNA分子性质不同、宿主细胞不同，其重组DNA导入宿主细胞的具体方法也不同，而将外源基因与报告基因共同导入感受态宿主细胞的方法，称作（）。

• A、电转化重组DNA技术
• B、共转化重组DNA技术
• C、体外包装转染重组DNA技术
• D、脂质体导入重组DNA技术

正确答案:B

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

第16题：

用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和载体DNA，产生不同的DNA片段的粘性末端。

正确答案:错误

第17题：

在酵母菌细胞内（）、（）和（）中都含有DNA，后者可以做为外源DNA片断载体，用于遗传工程研究。

正确答案:细胞核；线粒体；质粒

第18题：

载体DNA与外源基因链接的方法有哪几种？

正确答案: （1）黏性末端连接法：DNA连接酶，辅助因子NAD+提供能量。
（2）平末端连接法：
①同聚物加尾法：利用末端脱氧核苷酸转移酶，不直接使用T4DNA连接酶，连接效率低。
②衔接物连接法：用化学方法合成的，由10~12个核苷酸组成，具有1个或数个限制性内切酶位点的平末端双链寡核苷酸片段称衔接物。
③人工接头连接法：一端是平端，另一端是黏性末端，衔接物两端都是平末端。

第19题：

提高重组率的方法包括（I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间）（）

• A、I+II
• B、I+II+III
• C、I+III+IV
• D、II+III+IV

正确答案:A

第20题：

DNA重组的顺序是（）①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。

• A、①②③④
• B、①④②③
• C、①③②④
• D、④①③②

正确答案:C

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：