当PCR产物中出现非特异性扩增时，下列可减少非特异性产物的方法是( )。A、增加模板的量B、增加引物的量C、增加dNTP的量D、改变缓冲液E、适当提高退火温度

题目

当PCR产物中出现非特异性扩增时，下列可减少非特异性产物的方法是( )。

A、增加模板的量

B、增加引物的量

C、增加dNTP的量

D、改变缓冲液

E、适当提高退火温度

相似考题

1.PCR仪需设置不同温度循环主要解决的问题是A、模板DNA变性B、引物二聚体形成C、变性、退火、延伸D、非特异性PCR产物的扩增E、防止PCR产物污染

2.下列各项中,影响PCR反应特异性的因素不包括( )A、Mg2+浓度B、模板纯度C、引物长度D、退火温度E、变性时间

3.有关PCR的描述，错误的是（ ）。A.是一种酶促反应 B.引物决定特异性 C.模板的数量和纯度是影响PCR的重要因素 D.延伸时间越长，产物量越大 E.扩增对象是DNA

4.在PCR反应体系中，加入一定浓度的Mg2+的作用是A、保持一定的pHB、抑制非特异性扩增C、保持TaqDNA聚合酶的活性D、增加DNA模板的溶解度E、有利于引物和模板的结合

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  • 第1题：

    HIA基因分型法最常用的方法有

    A.PCR扩增产物直接测序
    B.DDGE
    C.PCR-SSCP
    D.DNA-RFLP
    E.PCR-序列特异性引物(sequene specific primer，SSP)分型法

    答案：E
    解析：

  • 第2题：

    酶反应动力学定量时的观察对象是（）

    • A、总单位时间内酶的减少或增加的量
    • B、总单位时间内底物减少或产物增加的量
    • C、总反应时间内酶的减少或增加的量
    • D、总反应时间内底物减少或产物增加的量
    • E、单位时间内酶的减少或增加的量

    正确答案:B

  • 第3题：

    提高PCR特异性的方法包括（）。

    • A、增强引物特异性
    • B、提高退火温度
    • C、提高模版质量
    • D、使用热启动聚合酶

    正确答案:A,B,C,D

  • 第4题：

    在定量PCR中，对原始模板准确定量的影响因素中，最大的是（）

    • A、原始模板的量
    • B、扩增效率
    • C、循环次数
    • D、扩增产物的量
    • E、循环阈值

    正确答案:B

  • 第5题：

    PCR反应体系中，较低量的模板导致扩增产量的降低和非特异性扩增的减少。


    正确答案:错误

  • 第6题：

    下列哪项因素是PCR技术所不需要的？（）

    • A、设计PCR特异性引物
    • B、必须有dNTP做底物
    • C、提供DNA模板
    • D、RNA聚合酶的催化
    • E、三步周期循环扩增

    正确答案:D

  • 第7题：

    PCR反应产物的特异性取决于（）

    • A、镁离子浓度
    • B、退火温度
    • C、引物碱基组成和长度
    • D、循环次数
    • E、A+B+C

    正确答案:E

  • 第8题：

    关于PCR扩增停滞的原因有很多种，但下列各项中，（）项不是主要原因。

    • A、底物（模板）过剩
    • B、dNTP的大量消耗
    • C、产物的聚集
    • D、非特异性产物的竞争性抑制

    正确答案:B

  • 第9题：

    单选题
    在PCR反应体系中，加入一定浓度的Mg2+的作用是（）
    A

    保持一定的pH

    B

    抑制非特异性扩增

    C

    保持TaqDNA聚合酶的活性

    D

    增加DNA模板的溶解度

    E

    有利于引物和模板的结合


    正确答案： A
    解析： TaqDNA聚合酶需依赖Mg2+为激活剂，一定浓度的Mg2+可保持TaqDNA聚合酶的活性，过高的Mg2+则会引起非特异性扩增。

  • 第10题：

    问答题
    在PCR扩增时，PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带，为什么？有何对策？

    正确答案： PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数过多有关。其次是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现，酶量过多有时也会出现非特异性扩增。
    其对策有：①必要时重新设计引物；
    ②减低酶量或调换另一来源的酶；
    ③降低引物量，适当增加模板量，减少循环次数；
    ④适当提高退火温度或采用二温度点法（93℃变性，65℃左右退火与延伸）。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    当PCR产物中出现非特异性扩增时，下列可减少非特异性产物的方法是（）。
    A

    增加模板的量

    B

    增加引物的量

    C

    增加dNTP的量

    D

    改变缓冲液

    E

    适当提高退火温度


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    在定量PCR中，对原始模板准确定量的影响因素中，最大的是（）
    A

    原始模板的量

    B

    扩增效率

    C

    循环次数

    D

    扩增产物的量

    E

    循环阈值


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    PCR实验的特异性由哪个因素决定（）

    A模板

    B引物

    C样本

    D扩增温度

    E聚合酶


    B
    略

  • 第14题：

    PCR引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。


    正确答案:正确

  • 第15题：

    PCR产物电泳检测时出现杂带的可能原因包括（）。

    • A、退火温度偏低
    • B、引物特异性差
    • C、存在污染
    • D、没在冰浴上操作

    正确答案:A,B,C,D

  • 第16题：

    PCR是（）。

    • A、扩增的是一对引物之外的片段
    • B、DNA片段体外扩增技术
    • C、产物一直呈指数积累
    • D、不需要模板
    • E、包括三个基本过程，即变性、退火和延伸

    正确答案:B,E

  • 第17题：

    在PCR反应体系中，加入一定浓度的Mg的作用是（）。

    • A、保持一定的pH
    • B、抑制非特异性扩增
    • C、保持TaqDNA聚合酶的活性
    • D、增加DNA模板的溶解度
    • E、有利于引物和模板的结合

    正确答案:C

  • 第18题：

    免疫组化染色中要减少或消除非特异性染色应（）

    • A、延长温育时间
    • B、适当提高缓冲液
    • C、进行抗原修复
    • D、增加抗体浓度
    • E、选择特异性高、效价高的第一抗体

    正确答案:E

  • 第19题：

    PCR实验的特异性主要取决于（）

    • A、DNA聚合酶的种类
    • B、反应体系中模板DNA的量
    • C、引物序列的结构和长度
    • D、四种dNTP的浓度
    • E、循环周期的次数

    正确答案:C

  • 第20题：

    单选题
    免疫组化染色中要减少或消除非特异性染色应（）。
    A

    延长温育时间

    B

    适当提高缓冲液

    C

    进行抗原修复

    D

    增加抗体浓度

    E

    选择特异性高、效价高的第一抗体


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    判断题
    PCR引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 错
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    单选题
    关于 PCR 扩增停滞的原因有很多种，但下列各项中，（）项不是主要原因。
    A

    底物（模板）过剩

    B

    dNTP的大量消耗

    C

    产物的聚集

    D

    非特异性产物的竞争性抑制


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    判断题
    PCR反应体系中，较低量的模板导致扩增产量的降低和非特异性扩增的减少。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

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