构建cDNA文库时，首先需分离细胞的A．染色体DNAB．线粒体DNAC．mRNAD．cDNA

题目

构建cDNA文库时，首先需分离细胞的

A．染色体DNA

B．线粒体DNA

C．mRNA

D．cDNA

相似考题

1.以下关于cDNA文库和基因组文库的关系说法正确的是()A、cDNA文库比基因组文库大B、cDNA文库比基因组文库小C、cDNA文库和基因组文库一样大D、二者大小随机，不能比较

2.构建基因组DNA文库时，首先需分离细胞的A．染色体DNAB．线粒体DNAC．mRNAD．cDNA

3.关于cDNA文库的叙述，哪些是正确的A.仅代表构建文库取材细胞当时表达的成套基因 B.同一种细胞在发育的不同阶段构建的文库，它们包含的基因不尽相同 C.正常肝细胞与肝癌细胞构建的cDNA文库,两者包含的基因不尽相同 D. cDNA文库中不包含内含子序列及基因的调控序列

4.构建cDNA文库时，首先需分离细胞的A．B．C．D．

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  • 第1题：

    构建基因组DNA文库时，首先需分离细胞的( )。

    A.染色体DNA
    B.线粒体DNA
    C.总mRNA
    D.rRNA
    E.tRNA

    答案：A
    解析：

  • 第2题：

    重组DNA技术中，目的基因的获取方法不包括（）

    • A、通过PCR合成
    • B、化学直接合成
    • C、构建cDNA文库
    • D、构建基因组文库
    • E、从基因组DNA中直接提取

    正确答案:E

  • 第3题：

    简述构建cDNA文库的基本操作？


    正确答案:（1）细胞总RNA的提取和mRNA分离
    （2）第一链cDNA和第二链cDNA合成并连接产生重组DNA
    （3）将重组DNA通过载体转入适当的宿主
    （4）筛选鉴别重组克隆
    （5）扩增和保存文库

  • 第4题：

    M13噬菌体适用于（）。

    • A、构建基因组文库
    • B、构建cDNA文库
    • C、克隆较大的DNA片段
    • D、克隆单链外源DNA片段进行序列分析
    • E、以上都对

    正确答案:D

  • 第5题：

    什么是基因文库？cDNA文库是用于哪类生物细胞的基因制备？


    正确答案:基因工程中，将某种生物全部基因组的遗传信息，贮存在可以长期保存的稳定重组体中，以备需要时能够随时应用它分离所需要的目的基因，这种保存基因组遗传信息的材料，称为基因组文库。cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。

  • 第6题：

    基因文库和cDNA文库有何不同，为什么要建立cDNA文库？


    正确答案:基因文库是指整套由基因组DNA片段插入克隆载体获得的分子克隆之总和。cDNA文库是指细胞全部mRNA逆转录成cDNA并被克隆的总和。cDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。  真核生物的基因是断裂的，需经RNA转录后加工过程才使编码序列拼接在一起；真核生物的基因不能直接在原核生物中表达，只有加工成熟的mRNA经逆转录合成的cDNA接上原核生物表达控制元件，才能在原核生物中表达；另外，真核生物细胞中只有一小部分mRNA进行表达，mRNA的稳定性差。因此，需要构建cDNA文库，用于基因表达等方面的研究。

  • 第7题：

    什么是cDNA文库法？它的构建流程是什么？


    正确答案: cDNA：指体外用逆转录酶催化，以mRNA为模板合成的互补DNA。
    cDNA文库：汇集某生物成熟mRNA为模板逆转录而成cDNA序列的的重组DNA群体.Λ噬菌体和质粒为载体构建。
    操作程序
    （1）总RNA的提取；注意抑制RNA酶的活性，盐酸胍，二乙基焦碳酸；
    （2）mRNA的分离：选用高度分化的组织，末端带有polyA；
    （3）cDNA双链的合成；
    （4）cDNA与载体的连接；
    （5）噬菌体的包装以及转染或质粒的转化。

  • 第8题：

    单选题
    根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA 文库等。在下列文库中，（）属 cDNA 文库。
    A

    YAC文库

    B

    MAC文库

    C

    扣减文库

    D

    BAC文库


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    单选题
    构建基因组DNA文库时，首先需分离细胞的（　　）。
    A

    染色体DNA

    B

    线粒体DNA

    C

    总mRNA

    D

    rRNA

    E

    tRNA


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    填空题
    构建基因组文库时连接方法主要是（）；而构建 cDNA 文库，可用（）；或（）。

    正确答案： 黏性末端连接,接尾连接法,人工接头连接法
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    构建一个理想的cDNA文库需要考虑的因素有哪些？

    正确答案： A.cDNA文库的质量
    （1）文库的代表性：是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息（即mRNA种类），是体现文库质量的最重要指标。
    （2）重组cDNA片段的序列完整性：5’端非翻译区，中间的编码序列和3’端非翻译区，文库中重组cDNA片段尽可能完整的反应出天然基因的结构，cDNA是否完整，对文库使用价值的影响并不是绝对的 完整性这一指标要根据研究目的及筛选方法来灵活考虑，使细胞中表达出的mRNA在构建的cDNA文库中尽可能含有相应其各部分序列的重叠cDNA片段是其中一种折中的做法。
    B.文库筛选可选择的具体方法，决定文库筛选方法的主要因素是
    1.构建文库的克隆载体系统；
    2.相应的宿主细胞系统。
    最理想的情况是对于具体构建出的一个cDNA文库，应能够使用多种筛选方法，有效地分离鉴定出目的基因，从而使研究者能够在已有研究条件上，在文库筛选的具体方法上有灵活的选择余地。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    构建cDNA文库常用的载体是（）。
    A

    黏性质粒

    B

    M13噬菌体

    C

    λ噬菌体

    D

    细菌人工染色体

    E

    酵母人工染色体


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    构建一个理想的cDNA文库需要考虑的因素有哪些？


    正确答案: A.cDNA文库的质量
    （1）文库的代表性：是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息（即mRNA种类），是体现文库质量的最重要指标。
    （2）重组cDNA片段的序列完整性：5’端非翻译区，中间的编码序列和3’端非翻译区，文库中重组cDNA片段尽可能完整的反应出天然基因的结构，cDNA是否完整，对文库使用价值的影响并不是绝对的 完整性这一指标要根据研究目的及筛选方法来灵活考虑，使细胞中表达出的mRNA在构建的cDNA文库中尽可能含有相应其各部分序列的重叠cDNA片段是其中一种折中的做法。
    B.文库筛选可选择的具体方法，决定文库筛选方法的主要因素是
    1.构建文库的克隆载体系统；
    2.相应的宿主细胞系统。
    最理想的情况是对于具体构建出的一个cDNA文库，应能够使用多种筛选方法，有效地分离鉴定出目的基因，从而使研究者能够在已有研究条件上，在文库筛选的具体方法上有灵活的选择余地。

  • 第14题：

    简述cDNA的扣除文库的构建。


    正确答案: 将两种不同组织来源的mRNA进行比较，用扣除杂交排除相同部分，即共同表达的那部分mRNA，选出有差异的、特异表达的mRNA，构建成的cDNA文库。
    构建过程：从两种不同类型的细胞T、D分别提取mRNA，T细胞mRNA逆转录合成单链的cDNA，向T细胞cDNA中过量加入D细胞总mRNA。
    两者有共同序列的mRNA和cDNA形成mRNA-cDNA杂合分子，余下单链cDNA代表了仅仅存在于T细胞表达的基因信息。

  • 第15题：

    请举例说明构建噬菌体cDNA文库的主要操作。


    正确答案:先提取mRNA，反转录成cDNA。
    再把cDNA进行PCR扩增，导入感受态大肠杆菌。
    送测——把连接好的大肠杆菌，扩大培养，提取好的大肠杆菌送到测序公司测序。公司有大肠杆菌的序列，不符合的就是转录进去的cdna序列。

  • 第16题：

    构建cDNA文库需要用到哪些工具酶？


    正确答案: 逆转录酶，DNA聚合酶I，单链核酸酶S1，末端转移酶，限制性核酸内切酶，DNA连接酶。

  • 第17题：

    构建cDNA文库常用的载体是（）。

    • A、黏性质粒
    • B、M13噬菌体
    • C、λ噬菌体
    • D、细菌人工染色体
    • E、酵母人工染色体

    正确答案:C

  • 第18题：

    简述cDNA文库构建步骤。


    正确答案: （1）酶促合成法制取cDNA，（2）从组织或细胞中制备总RNA和mRNA，（3）合成cDNA第一条链（4）cDNA第二条链的合成

  • 第19题：

    用逆转录方法构建的cDNA文库不具有（），但有启动子与终止子。


    正确答案:内含子

  • 第20题：

    单选题
    细胞坏死的表现为（）
    A

    细胞肿胀、溶解

    B

    染色体无变化

    C

    DNA电泳呈梯状条带

    D

    线粒体固缩

    E

    线粒体数量增多


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    构建cDNA文库时，首先须分离细胞的（　　）。
    A

    染色体DNA

    B

    线粒体DNA

    C

    总mRNA

    D

    总tRNA

    E

    总rRNA


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    在构建cDNA文库时，为什么常用GC接尾而不用AT接尾法连接？

    正确答案： GC接尾法，可通过载体的PstI的切点回收外源片段，而AT接尾尚无回收的好办法。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    简述cDNA文库的构建过程。

    正确答案： 构建cDNA文库的主要步骤：
    ①mRNA分离；
    ②cDNA第一链合成；
    ③cDNA第二链合成
    ④载体与cDNA的连接；
    ⑤噬菌体的包装及转染；
    ⑥cDNA文库的扩增和保存。
    解析： 暂无解析

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