在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的酶是DNA（ ）A.解链酶 B.聚合酶 C.连接酶 D.内切酶

第1题：

第2题：

第3题：

第4题：

第5题：

DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术的应用不包括（）

• A、基因诊断
• B、基因治疗
• C、转基因和基因敲除
• D、单克隆抗体制备
• E、基因工程药物、疫苗和抗体

正确答案:D

第6题：

关于重组DNA技术的叙述，正确的是（）。

• A、质粒、噬菌体可作为载体
• B、限制性内切酶是主要工具酶之一
• C、重组DNA由载体DNA和目标DNA组成
• D、重组DNA分子经转化或传染可进入宿主细胞
• E、进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白

正确答案:A,B,C,D

第7题：

在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）

• A、限制性内切酶
• B、DNA聚合酶
• C、DNA连接酶
• D、反转录酶

正确答案:B

第8题：

DNA重组是酶在生物技术上的成功应用，请简述DNA重组的步骤？

正确答案:1.目的基因的获得
方法有：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（放达效应）、人工合成
2.目的基因与载体连接
方法有：——粘性末端——全同源性、定向克隆（两种酶切）
定向克隆可防止高背景的产生，因为全同源性会造成载体自连、重组子、目的基因自连三种可能，重组子可能还会出现正反插入的情况，使筛选过程复杂。
——平末端
酶切后也有可能产生平末端，也会出现高背景。
——人工接头——连接子（连入带粘性酶切位点的片断，再酶切）、普适子（一条链连上片断，成为粘性末端）、T-A克隆（PCR中使用的Taq聚合酶会根据模板延伸至后在链末尾加上一个A，可在克隆载体上加上T，使之连接）、同聚物加尾（末端转移酶加尾）
由于平末端连接效率比较低，可在其两端人工修饰
反应体系：目的基因、载体、T4连接酶、缓冲液
3.重组DNA导入受体（宿主）细胞——转化、转染、转导、感染
主要运用的是原核转化（导入感受态细菌，感受态：处于易于吸收外缘DNA的状态，方法：氯化钙法：DNA与其形成羟基-磷酸钙复合物，抗DNase水解）、真核转染。
4.选与鉴定
方法：
——遗传学（表形）——插入失活、蓝-白筛选、抗性基因（四环素Tet、氨苄青霉素Amp）
——酶切，在电泳（分子量、构想）
——PCR（特异性引物）
——核酸杂交（southernblot）
——免疫学方法（westernblot）
——DNA测序（sanger、焦磷酸测序）

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

第16题：

第17题：

DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术又称（）

• A、基因工程
• B、蛋白质工程
• C、细胞工程
• D、酶工程
• E、分子工程

正确答案:A

第18题：

DNA克隆的基本步骤是（）。

• A、构建重组DNA分子→选择增殖细胞克隆→转化→得到重组DNA克隆
• B、构建重组DNA分子→选择增殖细胞克隆→得到重组DNA克隆→转化
• C、构建重组DNA分子→转化→选择增殖细胞克隆→得到重组DNA克隆
• D、细胞克隆选择增殖→构建重组DNA分子→转化→得到重组DNA克隆

正确答案:C

第19题：

在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）。

• A、限制性核酸内切酶
• B、DNA 聚合酶
• C、DNA 连接酶
• D、DNA 解链酶

正确答案:D

第20题：

外源基因与载体构成的重组DNA分子性质不同、宿主细胞不同，其重组DNA导入宿主细胞的具体方法也不同，而将外源基因与报告基因共同导入感受态宿主细胞的方法，称作（）。

• A、电转化重组DNA技术
• B、共转化重组DNA技术
• C、体外包装转染重组DNA技术
• D、脂质体导入重组DNA技术

正确答案:B

第21题：

第22题：

第23题：