检测细胞因子的ELISA法通常采用（）A、双抗夹心法B、双位点一步法C、间接法D、竞争法E、捕获法

竞争法测抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原为例，受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量成反比。答案选D

间接法是检测抗体最常用的方法，其原理是利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，只要更换不同的固相抗原，就可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。

ELISA法中双位点一步法时酶标抗体和含有抗原的待测标本同时加入。

此图所示为间接法测抗体的反应原理。

本题考察ELIsA间接法和间接法荧光免疫技术的应用。间接法只需更换不同的固相抗原，同一个酶标或荧光标记抗体可以用来检测多种被测物。

捕获法主要用于检测IgM抗体。

在双抗体夹心法测抗原时标本和酶标同时加入，当标本中待测抗原浓度过高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合而不再形成夹心复合物，所测结果偏低或出现假阴性，即为钩状效应。有图

在双抗体夹心法测抗原时，针对抗原两个不同决定簇的单抗分别做固相和酶标，测定时标本和酶标同时加入的技术为双位点一步法，此示意图即为该原理。

此图所示为间接法测抗体的反应原理。

在双抗体夹心法测抗原时，针对抗原两个不同决定簇的单抗分别做固相和酶标，测定时标本和酶标同时加入的技术为双位点一步法，此示意图即为该原理。

捕获法主要用于血清中某种抗体亚型的检测。先将针对IgM的第二抗体连接于固相载体，用以结合样品中的所有IgM，洗涤除去IgG等无关的物质，然后加入特异性抗原与待检IgM结合，再加入抗原特异的酶标抗体，最后形成固相二抗-IgM-抗原一酶标抗体复合物，加酶底物显色即可对样品中待检IgM是否存在及其含量进行测定。
捕获法主要用于血清中某种抗体亚型的检测。先将针对IgM的第二抗体连接于固相载体，用以结合样品中的所有IgM，洗涤除去IgG等无关的物质，然后加入特异性抗原与待检IgM结合，再加入抗原特异的酶标抗体，最后形成固相二抗-IgM-抗原一酶标抗体复合物，加酶底物显色即可对样品中待检IgM是否存在及其含量进行测定。故酶标记物是酶标记的鼠抗HBc抗体。
捕获法主要用于血清中某种抗体亚型的检测。先将针对IgM的第二抗体连接与固相载体，用以结合样品中的所有IgM，洗涤除去IgG等无关的物质，然后加入特异性抗原与待检IgM结合，再加入抗原特异的酶标抗体，最后形成固相二抗-IgM-抗原-酶标抗体复合物，加酶底物显色即可对样品中待检IgM是否存在及其含量进行测定。
捕获法也称反向间接法，可以消除待检类型抗体以外的其他物质对检测的干扰。
捕获法也称反向间接法，可以消除待检类型抗体以外的其他物质对检测的干扰。
标本离心不充分存在纤维蛋白，利用ELISA原理检测时会因为交联使洗涤不完全，出现假阳性。
标本严重溶血，血红蛋白具有过氧化物酶样活性，与辣根过氧化物酶作用相似，故可导致假阳性。
NaN₃破坏HRP的结构与活性。