变性高效液相色谱法

第1题：

第2题：

硫酸庆大霉素原料药和制剂的含量测定方法分别是（）。

A均为微生物检定法

B均为高效液相色谱法

C微生物检定法和高效液相色谱法

D微生物检定法和紫外分光光度法

E高效液相色谱法和紫外分光光度法

A
本题考查要点是“抗生素微生物检定法”。《中国药典》采用抗生素微生物检定法测定硫酸庆大霉素的含量：精密称取本品适量，加灭菌水定量制成每1mL中含1000单位的溶液，照抗生素微生物检定法的管碟法或浊度法测定。可信限率不大于7%。1000庆大霉素单位相当于1mg庆大霉素。因此，本题的正确答案为A。

第3题：

简述变性高效液相色谱法检测基因变异的优点。

正确答案: DHPLC突变检测技术与其它方法相比，具有更高的准确性和敏感性。
（1）DHPLC与各种电泳法的比较SSCP分析片段长度<300 bp，对于人类SNP的检出率为50～95％，尤其容易漏检位于发夹结构中的变异。CSGE检测杂合子的灵敏度与SSCP相当或稍低。而DHPLC对150bp~600bp的DNA片段的突变检出率都可达到100％，且而不需要特殊的样本处理。TGGE/DGGE对于异源双链及同源双链分子的检测灵敏度高出CSGE和SSCP很多。但对于较高温度的融解区域的突变检测，DHPLC的灵敏度要高于TGGE/DGGE。
（2）DHPLC与DNA测序的比较 对于频率高于20%的变异，直接测序的检出率为80％，DHPLC的检出率可达到100％；基因突变频率低于20%时就很难用测序方法检测到，而DHPLC可从待检样品中检测到占总基因量0.5-5%的突变等位基因，且重现性很好。

第4题：

反相高效液相色谱法

正确答案: 反相高效液相色谱法是指流动相极性大于固定相极性的高效液相色谱法。

第5题：

高效液相色谱法的特点是（）。

• A、高效
• B、高速
• C、成本低
• D、灵敏度高

正确答案:A,B,D

第6题：

高效液相色谱法特点（）

• A、高效
• B、高速
• C、灵敏度高
• D、选择性好
• E、样品用量少

正确答案:A,B,C,D,E

第7题：

简述高效液相色谱法的定量方法有几种？

正确答案: （1）内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量；
（2）外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量；
（3）加校正因子的主成分自身对照法；
（4）不加校正因子的主成分自身对照法；
（5）面积归一化法。

第8题：

简述高效液相色谱法特点。

正确答案:分离效能高、分析速度快、检测灵敏度高。

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

高效液相色谱法的主要类型？
液液分配色谱法（流动相和固定相都是液体）、液固分配色谱法（流动相为液体，固定相为吸附剂）、离子对色谱法、离子交换色谱法（基于离子交换树脂上可解离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换，根据这些离子对交换剂具有不同的亲和力而将它们分离）、离子色谱法（离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相）、空间排阻色谱法（以凝胶为固定相）。
略

第14题：

变性高效液相色谱法可分离（）

• A、单链DNA分子
• B、双链DNA分子
• C、环状DNA分子
• D、超螺旋DNA分子
• E、部分双链DNA分子

正确答案:A,B,E

第15题：

高效液相色谱法常用的固定相是（）

• A、气相色谱法
• B、高效液相色谱法
• C、甲醇-水或乙腈-水
• D、紫外检测器
• E、十八烷基硅烷键合硅胶（OCS）

正确答案:E

第16题：

简述正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法的适用性。

正确答案: 正相高效液相色谱法是指流动相的极性小于固定相极性的高效液相色谱法，主要用于溶于有机溶剂的极性和中等极性物质的分离分析，如糖类、氨基酸等；反相高效液相色谱法是指流动相的极性大于固定相极性的高效液相色谱法，主要用于溶于非极性至中等极性物质的分离分析，如黄酮类、生物碱等。

第17题：

高效液相色谱法的定性指标是（）。

正确答案:保留时间

第18题：

高效液相色谱法的分离效能比经典液相色谱法高，主要原因是（）

• A、载液种类多
• B、操作仪器化
• C、采用高效固定相
• D、采用高灵敏度检测器

正确答案:C

第19题：

高效液相色谱法测定低聚糖原理及操作步骤。

正确答案:原理：以乙腈、水作流动相在碳水化合物分析柱上糖的分离顺序是先单糖后双糖，先低聚后多聚，以示差折射检测器检测。
操作步骤：样品处理：1、固体样品加水，超声，定溶，用0.45um过滤测定。2、奶制品加无水乙醇，加热蛋白质沉淀，过滤，浓缩后定刻度。3、饮料或口服液，加水稀释定至刻度。测定。

第20题：

环境监测分析中常应用高效液相色谱法，试简述高效液相色谱法的特点。

正确答案: 分离效能高、选择性高、检测灵敏度高及分析速度快。

第21题：

第22题：

第23题：